Спермограмма по тесту морфологии крюгера

Для чего нужен метод диагностики? Показания

Из миллионов сперматозоидов, попадающих во влагалище после секса, лишь 1/100 часть приближается к яйцеклетке. Даже эти немногие должны быть достаточно здоровыми, чтобы выжить в женском теле в течение продолжительного времени. При попытке зачать ребенка, чем больше здоровых сперматозоидов, тем больше шансов, что один из них доживет до яйцеклетки.

Анализ спермы измеряет ряд параметров, которые влияют на вероятность попадания мужских клеток в яйцеклетку. Некоторые из параметров являются индикаторами производства и здоровья сперматозоидов, другие относятся к качеству спермы и ее способности помогать мужским гаметам на пути к яйцеклетке.

Морфология по Крюгеру, норма которой стандартная для мужчин всех возрастов, – это «строгий» тест, проводимвый с парами, бесплодие которых имеет необъяснимый характер, даже если анализ спермы и нестрогая морфология в норме.

Когда у мужчины уменьшилось количество сперматозоидов нормальной формы по «строгому» морфологическому анализу Крюгера, то он подвергается риску неудачного оплодотворения или низкой скорости зачатия.

Нормальные сперматозоиды

Для того чтобы определить, как выглядят сперматозоиды в норме необходимо соотнести их с определенными диагностическими критериями. Сперматозоиды имеют несколько функциональных морфологических форм, которые отличаются размером шейки, головки и жгутика.

Норма ВОЗ

4% и более сперматозоидов должны быть морфологически нормальными (идеальными)

Долгое время считалось, что в сперме здорового мужчины количество нормальных сперматозоидов не превышает 81%, с патологией шейки — около 15%, а хвоста — 2% (Е. Тетер (1968г.)).

В научных кругах в течение многих лет происходили и происходят дискуссии относительно того, какие же спермии считать нормальными. В 1987 году Крюгер (Kruger) предложил считать нормальными сперматозоиды, проникшие через цервикальный канал за 8 часов.

Такой подход обусловлен тем, что данные спермии прошли сложный путь самостоятельно (естественный отбор) и могут считаться нормальными. Согласно такому подходу, любые пограничные изменения следует относить к патологии.
Жесткие медицинские требования к оценке жизнеспособности спермиев приняты в связи со сведениями относительно морфологической классификации сперматозоидов в отношении их оплодотворяющей способности.

Строгие критерии отбора предъявляются к большинству морфологических форм, так как они приняты исследователями свойств эякулята.

Морфология сперматозоидов

Скачать образец результата

1. Оценка физико-химических свойств.
2. Подсчет числа сперматозоидов, оценка жизнеспособности и подвижности. Эти показатели являются самыми важными для наступления беременности в паре. В нашей лаборатории обязательно подсчитывается такой показатель как TMSC — общее количество подвижных сперматозоидов в эякуляте. Сдать спермограмму для определения этих параметров можно в нашей лаборатории на Дубровке.
3. Важнейший пункт для оценки здоровья мужчины – подсчет лейкоцитов в эякуляте.
4. Отдельный блок — оценка морфологии сперматозоидов. Здесь описывается, как сперматозоид выглядит, какого размера и формы его структуры. Проводится подсчет морфологически нормальных и ненормальных форм. Этот параметр позволяет оценить вероятность наступления беременности естественным путём и с помощью вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ).

Существуют генетически обусловленные нарушения морфологии сперматозоидов (глобозооспермия, макроцефалия, синдром обезглавленных сперматозоидов и дисплазия фиброзной оболочки) и вызванные стрессом (физиологические, психические и окружающая среда), которые обратимы, когда источник стресса исчезает.

Оценка морфологии в спермограмме – важная часть оценки способности к оплодотворению в бесплодной паре.

Согласно мировым стандартам и концепции «Потенциал» фертильности» пара проходит в таких случаях всестороннее углубленное обследование.

Тест по Крюгеру: внедрение в практику

В 1987 Крюгером и коллегами было проведено следующее исследование. На основании новых строгих критериев оценки нормальной морфологии сперматозоидов пациенты были разделены на 2 группы. В I группе (25 пациентов) нормальная морфология сперматозоидов составляла менее 14%, а во II группе (71 пациент) нормальная морфология сперматозоидов превышала 14%. Частота оплодотворения (на ооцит) составили в среднем 48% в группе I и 87% в группе II. Процент беременностей составил 4,5%  и 18,4%. Это исследование демонстрирует ценность анализа морфологии сперматозоидов с использованием критериев, рекомендуемых с точки зрения прогнозирования оплодотворения и, возможно, исхода беременности.

После первых статей каждый год появлялось в среднем 15 статей про использование строгих критериев.

В материале 1999 Крюгер пишет: «Оценка спермморфологии по строгим критериям является простым, экономически эффективным методом и может использоваться для повседневного использования клиницистами для принятия обоснованных клинических решений».

В 1994 году коллеги из института репродуктивной медицины в Норфолке написали, что строгие критерии морфологии являются отличным биомаркером способности оплодотворения сперматозоидов, независимо от подвижности и концентрации.

Ранние исследования были позже подтверждены тестами с зоной pellucida яйцеклетки и тестами на связывание сперматозоидов.

Карта фертильности мужчины

Состав карты фертильности:

• комплексная спермограмма с морфологической оценкой сперматозоидов по Крюгеру (прием спермы на анализ производится дважды); 
• MAR-тест IgG и IgA на выявление антител в семенной жидкости;
• биохимический анализ спермы;
• исследование на присутствие в сперме различных форм кислорода ROS и реакции оксидативного стресса (процесс, программирующий гибель клеток)
• TUNEL – обследование на наличие фрагментации ДНК половых клеток;
• исследование  акросомальной реакции и наличие акрозина;
• исследование сперматоизодов с помощью микроскопа — электронная микроскопия сперматозоидов.

Либеральные критерии оценки морфологии сперматозоидов

За последние 70 лет было разработано несколько классификаций для оценки морфологии сперматозоидов.

Ранние вклады, подчеркивающие важность морфологии сперматозоидов, были сделаны в начале 1930-х. Дальнейшая история оценки морфологии разделяется на два этапа: ранний либеральный подход (50-е годы) и строгий (тигербергский) подход (Menkveld, Kruger)

В раннем подходе, описанном Маклауд и Голд, представлены очевидные отклонения в строении головок сперматозоидов. Все сперматозоиды без четко определенных дефектов считались нормальными.

Чтобы добиться лучшей стандартизации, Элиассон в 1971 году сделал акцент на важности размера сперматозоидов. Также он классифицировал аномалии сперматозоидов на три группы: аномалии головки, средней части и хвосты

Нормальная голова должна была быть правильной овальной формы.

Однако  сперматозоиды встречаются в почти бесконечном разнообразии форм, и хотя были приведены стандарты для размеров «нормальной» головки сперматозоидов человека, ни биологических, ни клинических основ для этих «нормальных значений» не было.

Первые издания ВОЗ по оценке эякулята

Классификация ВОЗ была впервые опубликована в 1980 году. Она была основана на исследованиях Маклауда и Элиассона. В 1-м издании средняя нормальная морфология составляла 80,5%. Во 2-м издании в 1987 году значение процента нормальных форм составляло 50%, а морфологические изменения были разделены на 3 группы – патология головы, средней части и хвоста.

Строгие критерии (тайгербергские)

В 1980-е годы проведено несколько исследований, которые показали, что сперматозоиды, выделенные из слизи шейки матки и матки, маточных труб, перитонеальной жидкости  показали улучшенную морфологию по сравнению со сперматозоидами в исходном образце спермы. Сперматозоиды, обнаруживаемые в слизи на уровне внутреннего зева, обычно представляют собой более гомогенную популяцию.  

Менквилд и соавторы опубликовали описание морфологических нормальных сперматозоидов, основанное на клетках, полученных после проникновения через хорошую цервикальную слизь. Определение морфологически нормального сперматозоида заключалось в следующем:

Это определение, по существу, такое же, как и описание, описанное Элиассоном в 1971 г. в отношении размера и формы, но обеспечивает более подробное описание акросомы и осевого прикрепления шеи. Однако принцип Эллиасона «если вы не уверены, что сперматозоид ненормальный, он должен рассматриваться как нормальный», был изменен на принцип, согласно которому в этих случаях сперматозоиды должны классифицироваться как патологические. По строгим критериям сперматозоиды со слегка ненормальными «пограничными» головками классифицируются как ненормальные. Диапазон, определяющий нормальную форму, мал, и это является одним из наиболее важных аспектов этой классификации.

Исследователи показали, что оценка по более строгим критериям повышает объективность исследования и уменьшает межлабораторные различия.

Описание

Комплексное исследование включает анализ спермограммы, MAR-тест, биохимию спермы (цинк, лимонная кислота, фруктоза) + фотофиксация (3 препарата). Профиль позволяет провести диагностику мужского бесплодия.
Спермограмма — метод исследования эякулята, который проводят с целью оценки мужской фертильности и выявления возможных заболеваний половой системы.Стандартная спермограмма включает:

• макроскопическое исследование: определение консистенции, объёма, цвета, вязкости и рН эякулята;
• микроскопическое исследование: изучение подвижности сперматозоидов и наличия агглютинации, подсчет количества сперматозоидов, изучение морфологии сперматозоидов, клеток сперматогенеза и дифференциальная диагностика живых и мертвых сперматозоидов в окрашенных препаратах.

MAR-тест — это анализ, при котором определяется соотношение нормальных сперматозоидов к количеству сперматозоидов с антиспермальными антителами на поверхности. Образующиеся на поверхности сперматозоидов аутоиммунные антитела IgA и IgG могут являться одной из причин бесплодия. В результате деятельности аутоиммунных антител образуется оболочка на поверхности сперматозоида, которая препятствует оплодотворению женской яйцеклетки. Это происходит из-за того, что организм из-за ряда причин стал воспринимать собственные половые клетки как чужеродные тела и атаковать их. Всемирная Организация Здравоохранения рекомендует включать этот тест в каждое исследование эякулята (спермограмму).
MAR-тест позволяет провести диагностику мужского бесплодия.Биохимия спермы (цинк, лимонная кислота, фруктоза) — исследование, которое проводится для диагностики концентрации веществ, влияющих на образование, морфологическое строение и оплодотворяющую способность мужских половых клеток. Наиболее активное участие в сперматогенезе и процессе слияния яйцеклетки и сперматозоида принимают фруктоза, лимонная кислота, цинк.Фруктоза — основа питания сперматозоидов, главный источник их энергии. Образование ее почти полностью происходит в семенных пузырьках под влиянием андрогенов, и поэтому по ее концентрации можно судить о секреторной функции семенных пузырьков.
Цинк — вырабатывается предстательной железой. Уменьшение его концентрации в эякуляте свидетельствует о понижении качества сперматозоидов, особенно это влияет на их подвижность. Для восстановления уровня цинка и повышения качества спермы мужчинам следует употреблять в пищу продукты, насыщенные цинком, а также селеном: спаржу, зелень, сельдерей, морскую рыбу и иные морепродукты.Лимонная кислота —влияет на правильное строение сперматозоидов, и их способность проникать в яйцеклетку. Снижение уровня лимонной кислоты наблюдается при воспалительных процессах в урогенитальном тракте, так как она вырабатывается предстательной железой. В таком случае выявляется снижение либо утрата функции сперматозоидов.Фотофиксация препарата — изображение на бумажном носителе, полученное при микроскопировании препарата.
Подготовка
Спермограмму сдают после полового воздержания. Рекомендуемый срок воздержания 2–7 дней. В период подготовки нельзя употреблять алкоголь в любых количествах.
  
За 7–10 дней необходимо исключить прием лекарственных препаратов, процедуры с перегреванием: УВЧ, сауна, баня. 
В день, предшествующий выполнению анализа, желательно исключить тяжелые физические и психологические нагрузки. 
После выполнения массажа простаты должно пройти не менее 3-х дней.
Если в период подготовки были простудные или другие острые заболевания, сопровождавшиеся подъемом температуры, стоит отказаться от выполнения исследования.
Показания:

• бесплодный брак;
• предполагаемое иммунологическое бесплодие у мужчин.

С помощью полученных результатов можно сделать выводы о мужском бесплодии, простатите и возможных инфекциях

Оценивать фертильность эякулята по отдельно взятым параметрам некорректно, необходимо принимать во внимание все показатели. При диагностике мужского бесплодия при результатах, отличных от нормы, необходимо через 1–2 недели пересдать данное исследование и с полученными результатами обратиться к андрологу, для выявления причин патологии

При повторном исследовании желательно придерживаться, по возможности, одинаковых периодов воздержания для правильной оценки полученных результатов в динамике.

Инфекции и беременность: возможные риски

Беременность с помощью ЭКО кардинально ничем не отличается от естественной, за исключением механизма оплодотворения – он происходит вне организма женщины в специальном инкубаторе. Оплодотворенная яйцеклетка затем пересаживается в матку пациентки, после чего она вынашивает и рожает ребенка обычным путем. Соответственно, беременность после экстракорпорального оплодотворения подвержена тем же рискам, одним из которых является заражение плода материнскими инфекциями. Воздействие инфекционных возбудителей на ребенка во внутриутробный период достаточно разнообразно и зависит от многих факторов, среди которых состояние организма самого эмбриона, тип заболевания, срок инфицирования и т. д. К наиболее распространенным негативным последствиям заражения инфекцией матери и ее плода при ЭКО относятся:

• самопроизвольное прерывание беременности (выкидыш) – обычно развивается на раннем (первые 2 недели) сроке инфицирования из-за нарушения процесса образования эмбриона;
• замершая беременность – аномалия, возникающая обычно в первом триместре беременности и выражающаяся в прекращении развития плода, его смерти и последующем выкидыше;
• пороки развития – аномалии тканей и органов плода, возникающие из-за непосредственного воздействия на них инфекционного агента (бактерии, вируса, грибка и т. д.) или вследствие иммунной реакции на них со стороны организма самого ребенка или его матери;
• заболевания в более позднем возрасте – в этом случае зараженный ребенок рождается здоровым, но инфекция или ее побочные эффекты проявляются в нем в более позднем возрасте.

Тяжесть последствий заражения в период внутриутробного развития индивидуальна и может варьироваться от тяжелых поражений, несовместимых с жизнью, до тяжелых, средних и легких отклонений. Часто зараженные дети не заболевают сами, но являются носителями инфекций и могут передать их своим детям или другим людям. Возможна и полная санация инфекционного возбудителя организмом ребенка с выработкой иммунитета

Точно предугадать течение таких инфекций невозможно, поэтому рекомендуется их профилактика (вакцинация, соблюдение мер предосторожности) или оперативное лечение до или в период беременности.

Попадание инфекционного возбудителя в организм ребенка в период вынашивания после естественного зачатия или ЭКО возможно следующими путями:

• трансплацентарным – из кровотока матери в кровеносную систему плода через плаценту (характерно для токсоплазмоза и вирусных заболеваний);
• восходящим – при попадании инфекции (например, хламидий, грибков, бактерий) из влагалища женщины в ее матку с последующим инфицированием плода;
• нисходящим – при проникновении инфекционных возбудителей из маточных труб в полость матки;
• контактным – при прохождении плода во время родов по зараженным половым путям матери.

Также ребенок может заразиться во время родов при контакте с зараженной кровью или выделениями (мочой, калом) матери или при совершении хирургических манипуляций плохо простерилизованными инструментами.

Факторы, негативно влияющие на способность к оплодотворению

Вопросом, как повысить фертильность у мужчин, многие пациенты задаются на этапе планирования детей. Мужское бесплодие – достаточно распространенный диагноз. Часто он спровоцирован неправильным образом жизни, злоупотреблением вредными привычками.

Среди негативных факторов:

• инфекционные заболевания половой системы;

• воспалительные процессы в области малого таза;

• хронические заболевания (сахарный диабет, гипертензия);

• ожирение;

• высокие психологические нагрузки;

• стрессовые состояния;

• травмы половых органов;

• злоупотребление алкоголем и табаком;

• неполноценное питание;

• несоблюдение режима, чрезмерные нагрузки при отсутствии нормального отдыха и сна;

• перегрев яичек.

Какие результаты может показать

Развернутая спермограмма оценивает не только головку сперматозоида, но и другие его части, подвижность, размеры и прочее.

В норме у зрелых спермиев наблюдается головка правильной овальной формы, акросома выделена, хвост и шейка имеют четкие и правильные формы. Длина головки половой клетки должна быть 4-5,5 мкм. В ширину спермий должен составлять 2,5-3,5 мкм. Шейка спермия маленькая, около 1 мкм. В мембране хорошо видны плазматические капли, размер их не должен превышать 1/3 от размера самой мембраны.

Хвост сперматозоида ровный, не закрученный и имеет одинаковый диаметр по всей длине, но в середине возможно незначительное сужение. Соотношение головки и хвоста должно быть по длине 1:9 или 1:10.

Важно помнить, что расшифровкой анализов может заниматься только специалист, ведь плохие результаты являются только маркером заболевания, но не его причиной. Критерии Крюгера к сперматозоидам можно увидеть на таблице:

Критерии Крюгера к сперматозоидам можно увидеть на таблице:

При наличии патологий могут менять свои свойства как морфология сперматозоида, так и физико-химические параметры эякулята. Среди таких явлений могут быть диагностированы:

1. Олигоспермия — количество эякулята менее 1,5 мл. Из-за этого бесплодие возможно по причине того, что семенной жидкости не достаточно, чтоб нейтрализовать кислотность влагалища, и половые клетки погибают.
2. Олигозооспермия — общее число сперматозоидов в семенной жидкости менее 20 миллионов.
3. Дискинезия — подвижных сперматозоидов в эякуляте менее 20%.
4. Тератозооспермия — сперматозоидов с патологиями строения более 7%. Такой диагноз может говорить не только о сложностях с зачатием, но и постоянным риском выкидыша или замершей беременности из-за генетических мутаций половой клетки.
5. Олигоастенозооспермия — концентрация сперматозоидов и их подвижность понижена.
6. Олиготератозооспермия— снизилось количество сперматозоидов, и наблюдается увеличение числа аномальных клеток.
7. Астенотератозооспермия – снижение подвижности сперматозоидов и нормальной морфологии.
8. Олигоастенотератозооспермия — снижение подвижности, количества и нормальной морфологии спермиев.
9. Лейкоцитоспермия – появление лейкоцитов в сперме более 3-4 единиц в поле зрения. Наличие белых клеток крови в эякуляте является естественным, но при повышенных показателях необходимы дополнительные исследования на предмет инфекционных возбудителей. Лейкоциты повышаются при воспалительных процессах.
10. Гематосмермия или гемоспермия — появление эритроцитов в сперме. Нередко семенная жидкость при этом окрашивается в красный цвет. Такая патология может наблюдаться при варикоцеле, простатите, инфекциях, раке простаты и других патологических состояниях организма.
11. Акинозооспермия — все сперматозоиды неподвижны.
12. Азооспермия — полное отсутствие сперматозоидов в эякуляте. В этом случае зачатие естественным путем невозможно, потому необходимо прибегать к репродуктивными технологиям. Причиной такого нарушения может быть плохая генетика
13. Лецитиновые зерна — в норме их количество должно достигать 1 млн, но их наличие или отсутствие не влияет на качество сперматозоидов. Чаще всего исследуется для проверки работы простаты.
14. Вискозипатия — высокая вязкость эякулята, более 0,5 мм. Этот параметр учитывается по причине того, что в слишком вязкой среде сперматозоиды ограничены и не могут свободно передвигаться, как следствие — неспособность оплодотворить яйцеклетку.
15. Агглютинация сперматозоидов — склеивание сперматозоидов в результате нарушения гемотестикулярного барьера. Обычно является следствием наличия в организме антиспермальных антител, которые вырабатываются при длительных воспалительных процессах.
16. ДНК фрагментация — разрыв или повреждение структурных цепочек спермия. Обычно связывается с воздействием свободных радикалов, которые продуцируются незрелыми клетками, находящимися в просвете канальца. При такой форме бесплодия иногда приходится прибегать к репродуктивным технологиям.

Важно помнить, что большинство из состояний поправимы при своевременном обнаружении проблемы и правильном лечении

Что такое MAR-тест?

По разным оценкам от 10 до 20 процентов бесплодия связано с иммунным фактором.

В развитии иммунного бесплодия основное место занимают аутоантитела к собственным сперматозоидам. Сбой механизмов защиты на любом уровне может способствовать появлению антиспермальных антител. Повреждение гематотестикулярного барьера открывает для иммунной системы доступ к ткани яичка.

Антиспермальные антитела могут снижать подвижность сперматозоидов, нарушать функциональную целостность мембраны сперматозоидов, повышать уровень свободных радикалов, приводить к фрагментации ДНК сперматозоидов (нарушать морфологию).

MAR-тест – основной тест на наличие иммунного фактора бесплодия, т.е. повышенного количества антиспермальных антител в сперме.

MAR-тест (mixed antiglobulin reaction) с антиспермальными антителами класса IgA и IgG проводят путем смешивания образца нативной спермы с частичками латекса или эритроцитами, покрытыми человеческими антителами класса IgA или IgG. К этой смеси добавляют IgG-антисыворотку. Образование смешанных агглютинатов между частичками и подвижными сперматозоидами показывает, что последние покрыты антителами. Диагноз иммунное бесплодие правомочен только в том случае если частички прикреплены к не менее чем 50% подвижных сперматозоидов.

В каком случае не следует сдавать MAR-тест?

MAR-тест не выполним при следующих параметрах спермы:

1) Если в спермограмме очень мало подвижных сперматозоидов или некрозооспермия (мертвые сперматозоиды).

2) При криптозооспермии (единичные сперматозоиды в эякуляте) или азооспермии (сперматозоиды в эякуляте отсутсвуют).

В такой ситуации следует обратиться к андрологу и выполнить MAR-тест после лечения.