Как происходит оплодотворение яйцеклетки

Бластоциста

Когда морула попадает в полость матки, через прозрачную зону с микроокружения эмбриона начинает просачиваться жидкость, которая накапливается в межклеточных пространствах внутренней клеточной массы. Постепенно межклеточные пространства сливаются и формируют единую полость — бластоцель. Клетки внутренней клеточной массы образуют эмбриобласт и локализованы на одном полюсе, тогда как клетки наружной клеточной массы или трофобласт, становятся плоскими и образуют стенку бластоцисты. Прозрачная зона исчезает, что дает возможность бластоцистам осуществить имплантацию.

Клетки трофобласта, которые локализуются над эмбриобластным полюсом бластоцисты, около шестого дня начинают врастать в эпителий эндометрия — слизистой оболочки матки. Прикрепление и инвазия трофобласта обеспечиваются действием интегринов, выделяемых клетками трофобласта, а также ламинином и фибронектином межклеточного матрикса эндометрия.

Имплантация является результатом комплексных взаимодействий трофобласта и эндометрия. К концу первой недели развития зародыш человека проходит стадию морулы, бластоцисты и начинает имплантацию в слизистую оболочку матки. Итак, имплантация происходит в конце первой недели развития.

Клинические корреляции. Аномальные зародыши обычно погибают через 2-3 нед после оплодотворения, поэтому их частоту определить трудно. Полагают, что около 50% беременностей заканчиваются самопроизвольными выкидышами, и половина из них обусловлена хромосомными аномалиями. Эти выкидыши является следствием так называемых «пренатальных фильтров», что отбраковывают аномальные эмбрионы и тем самым уменьшают количество индивидов с врожденными пороками до 2-3% вместо 12%.

При комбинации методов экстракорпорального оплодотворения и полимеразной цепной реакции (ПЦР) проводится молекулярный скрининг эмбрионов с генетическими аномалиями (преимплантационная диагностика). Для этого достаточно выделить один бластомер из эмбриона ранней стадии развития и реплификовать его ДНК для дальнейшего исследования. Программа «Геном человека» занимается изучением связи специфических генов с различными клиническими синдромами.

Зачатие как точка отсчета

Зачатие может использоваться как точка отсчета при исчислении срока развития эмбриона. В работах по эмбриологии человека срок развития эмбриона всегда отсчитывается от дня оплодотворения (так называемый ), в качестве примера можно привести наиболее распространенные в мире таблицы Стритера (таблицы нормального развития человека, именуемые также таблицами Карнеги), в которых выделяют 56 стадий развития, датируемые от дня оплодотворения. В акушерстве принято отсчитывать срок беременности от даты последней менструации (так называемый ). Овуляция и зачатие происходят приблизительно на две недели позднее даты начала последней менструации (Обычно у женщин 28-дневный менструальный цикл, поэтому самым возможным временем, когда был зачат будущий малыш, является 14-й день после начала «критических дней», то есть, когда совершается овуляция).

Зачатие нередко рассматривается как начало человеческой жизни. Эта точка зрения может быть обусловлена определёнными религиозными представлениями. Однако, как показал социологический опрос, проведенный в конце 2012 года, среди российских граждан её разделяют не только верующие (более 2/3), но и атеисты (более половины). Эту позицию разделяет «абсолютное большинство российских женщин (74%) и около половины мужчин (50%)».

6.2. Строение и функции яйцеклетки

Яйцеклетка – крупная неподвижная клетка, обладающая за-па-сом питательных веществ. Размеры женской яйцеклетки составляют 150–170 мкм (гораздо больше мужских сперматозоидов, размер которых 50–70 мкм). Функции питательных веществ различны. Их выполняют:

1) компоненты, нужные для процессов биосинтеза белка (ферменты, рибосомы, м-РНК, т-РНК и их предшественники);

2) специфические регуляторные вещества, которые контролируют все процессы, происходящие с яйцеклеткой, например, фактор дезинтеграции ядерной оболочки (с этого процесса начинается профаза 1 мейотического деления), фактор, преобразующий ядро сперматозоида в пронуклеус перед фазой дробления, фактор, ответственный за блок мейоза на стадии метафазы II и др.;

3) желток, в состав которого входят белки, фосфолипиды, различные жиры, минеральные соли. Именно он обеспечивает питание зародыша в эмбриональном периоде.

По количеству желтка в яйцеклетке она может быть алеци-тальной, т. е. содержащей ничтожно малое количество желтка, поли-, мезо– или олиголецитальной. Человеческая яйцеклетка относится к алецитальным. Это обусловлено тем, что человеческий зародыш очень быстро переходит от гистиотрофного типа питания к гематотрофному. Также человеческая яйцеклетка по распределению желтка является изолецитальной: при ничтожно малом количестве желтка он равномерно располагается в клетке, поэтому ядро оказывается примерно в центре.

Яйцеклетка имеет оболочки, которые выполняют защитные функции, препятствуют проникновению в яйцеклетку более одного сперматозоида, способствуют имплантации зародыша в стенку матки и определяют первичную форму зародыша.

Яйцеклетка обычно имеет шарообразную или слегка вытянутую форму, содержит набор тех типичных органелл, что и любая клетка. Как и другие клетки, яйцеклетка отграничена плазматической мембраной, но снаружи она окружена блестящей оболочкой, состоящей из мукополисахаридов (получила свое название за оптические свойства). Блестящая оболочка покрыта лучистым венцом, или фолликулярной оболочкой, которая представляет собой микроворсинки фолликулярных клеток. Она играет защитную роль, питает яйцеклетку.

Яйцеклетка лишена аппарата активного движения. За 4–7 суток она проходит по яйцеводу до полости матки расстояние, которое примерно составляет 10 см. Для яйцеклетки характерна плазматическая сегрегация. Это означает, что после оплодотворения в еще не дробящемся яйце происходит такое равномерное распределение цитоплазмы, что в дальнейшем клетки зачатков будущих тканей получают ее в определенном закономерном количестве.

Сперматогенез

Созревание сперматозоидов (сперматогенез), в отличие от ооцитов, начинается только в пубертатном периоде и включает процессы преобразования сперматогония в сперматозоиды. При рождении мальчика половые клетки находятся в половых шнурах яичек (маленькие светлые клетки, окруженные поддерживающими клетками Сертоли). Поддерживающие клетки Сертоли происходят из клеток поверхностного эпителия яичка, подобно фолликулярных клеток яичника.

Вскоре перед половым созреванием в половых шнурах возникает просвет, и они превращаются в семенные канальцы. В настоящее время первичные половые клетки дают начало сперматогонии, среди которых есть 2 типа: сперматогоний типа А и сперматогоний типа Б. Сперматогонии типа А подразделяются митозом и обеспечивают резерв стволовых клеток, сперматогонии типа Б дают начало первичным сперматоцитам.

При нормальных условиях некоторые клетки типа А выходят из популяции стволовых клеток, чтобы начать дальнейшие генерации сперматогония, каждая из которых является более дифференцированной по сравнению с предыдущей генерацией. После завершения последнего деления клеток типа А формируются сперматогоний типа Б, который после серии митозов превращаются в первичные сперматоциты. Первичные сперматоциты вступают в продолженную профазу (22 дня), после которого наступает быстрое завершение мейоза І с образованием вторичных сперматоцитов.

Вторичные сперматоциты сразу начинают второе мейотическое разделение, в результате чего образуются гаплоидные сперматиды. В течение этих процессов, начиная с момента, когда клетки типа А оставляют популяцию стволовых клеток, и к образованию сперматида, цитокинез не заканчивается, и клетки последовательных генераций остаются связанными цитоплазматическими мостиками. Итак, потомки одного сперматогонического типа А формируют кластер половых клеток, сохраняющих контакт между собой на протяжении всей дифференциации.

Кроме того, сперматогоний и сперматиды протяжении своего развития погружены в глубокие карманы из клеток Сертоли. Клетки Сертоли обеспечивают поддержку для созревающих половых клеток, их защиту и питание, создают условия для высвобождения зрелых сперматозоидов.

Спермиогенез — ряд изменений, в результате которых сперматиды превращаются в сперматозоиды. У человека процесс преобразования сперматогоний в зрелый сперматозоид продолжается 64 суток. Спермиогенез включает следующие фазы:

1) формирование акросомы, покрывающей половину поверхности ядра и содержащей энзимы, помогающие пенетрации в яйцеклетку через ее микроокружение во время оплодотворения;

2) конденсацию ядра;

3) формирование шейки, средней части и хвоста;

4) отторжение большей части цитоплазмы.

Сформированные сперматозоиды направляются в просвет семенных канальцев. С семенных канальцев путем сокращения элементов их стенки сперматозоиды продвигаются в канальцы придатка яичка. Сначала сперматозоиды малоподвижны и приобретают активную подвижность в придатке яичка.

Клинические корреляции. Аномальные гаметы. У человека, как и у большинства млекопитающих, один фолликул яичника иногда может содержать 2 или 3 первичных ооцита. Такие ооциты могут дать начало двойни или тройни, но обычно они дегенерируют, не достигнув стадии зрелости. В редких случаях один ооцит может содержать два или три ядра. Такие многоядерные ооциты также погибают, не достигнув зрелости.

В отличие от ооцитов, аномалии сперматозоидов встречаются часто (около 10% сперматозоидов имеют дефекты). Головка, хвост, сперматозоиды могут быть маленькими, гигантскими или соединенными. Сперматозоиды с отклонениями в морфологии не имеют нормальной подвижности и обычно не способны к оплодотворению ооцитов.

Оплодотворение в зачатии

При естественном половом акте сперма мужчины попадает во влагалище женщины. Среда влагалища является губительной для сперматозоидов в силу повышенной кислотности (pH около 4). Спустя два часа после эякуляции большая часть сперматозоидов погибает во влагалище, но часть подвижных сперматозоидов проникает в шейку матки и далее в матку. Шейка матки заполнена шеечной слизью, которая является барьером для проникновения микроорганизмов из влагалища в матку, но также шеечная слизь может оказывать препятствие при проникновении сперматозоидов в матку. В патологических случаях чрезмерно вязкая шеечная слизь не позволяет пройти достаточному количеству сперматозоидов в матку, что может явиться причиной бесплодия (так называемый шеечный фактор бесплодия).

По сообщению южноафриканского андролога Тинуса Крюгера для успешного зачатия в матку должно проникнуть не менее 10 млн сперматозоидов. Из матки сперматозоиды проникают в маточные, или фаллопиевы трубы. При выборе направления сперматозоиды движутся против тока жидкости. Ток жидкости в маточных трубах направлен от яичника в сторону матки, соответственно сперматозоиды движутся от матки в сторону яичника.

Непосредственно оплодотворение происходит в ампулярной части фаллопиевой трубы (расширяющаяся часть трубы, расположенная ближе к яичнику).

Для осуществления слияния с яйцеклеткой сперматозоид должен преодолеть две оболочки:

1. лучистый венец (corona radiata),
2. блестящую оболочку (zona pellucida).

Процесс преодоления оболочек яйцеклетки сперматозоидом и последующее слияние называют «пенетрацией». Для преодоления лучистого венца — слоя фолликулярных клеток, окружающих яйцеклетку, сперматозоид использует фермент гиалуронидазу, расположенный на поверхности головки и расщепляющий внеклеточный матрикс, соединяющий клетки лучистого венца. Один сперматозоид не способен разрушить лучистый венец, требуется воздействие большого количества сперматозоидов для разрыхления и рассеивания клеток лучистого венца. Сперматозоид, который первым доберется до блестящей оболочки, вероятнее всего осуществит оплодотворение.

Для преодоления блестящей оболочки zona pellucida сперматозоид использует ферменты акросомы. Акросома представляет собой видоизмененную лизосому — мембранный пузырек, заполненный различными литическими ферментами. Акросома располагается на переднем конце головки сперматозоида. После достижения сперматозоидом блестящей оболочки, рецепторы на головке сперматозоида взаимодействуют с лигандами на блестящей оболочке. После такого взаимодействия (узнавания) акросома сливается с внешней мембраной сперматозоида и её содержимое оказывается снаружи. Ферменты акросомы локально разрушают блестящую оболочку, что в совокупности с движением сперматозоида позволяет ему проникнуть под блестящую оболочку и оказаться в непосредственной близости к оолемме — цитоплазматической мембране яйцеклетки.

Существуют специфические рецепторы на поверхности сперматозоида и яйцеклетки, которые служат для осуществления слияния половых клеток. После слияния ядро сперматозоида, центриоль и его митохондрия оказываются внутри яйцеклетки. В течение короткого времени в яйцеклетке развивается так называемая кортикальная реакция, служащая для обеспечения блока полиспермии. Суть кортикальной реакции состоит в высвобождении содержимого кортикальных гранул, или везикул, в наружную от яйцеклетки среду. Кортикальные гранулы располагаются под поверхностью наружной мембраны яйцеклетки и содержат различные литические ферменты.

После проникновения сперматозоида кортикальные везикулы сливаются с оолеммой (наружной мембраной яйцеклетки) и вышедшие из яйцеклетки ферменты модифицируют блестящую оболочку таким образом, что она становится недоступной для проникновения других сперматозоидов. Таким образом, после проникновения первого сперматозоида, остальные сперматозоиды не способны оплодотворить яйцеклетку. Механизм, препятствующий проникновению более одного сперматозоида в яйцеклетку, получил название «блок полиспермии». У млекопитающих блок полиспермии развивается в течение нескольких минут.

Почему истощается овариальный резерв

Девочка рождается с определенным запасом яйцеклеток (ооцитов), заключенных в фолликулы. В начале ее жизни яичниковая ткань содержит из 5-7 млн штук таких клеток. Но постепенно часть яйцеклеток рассасывается, и к наступлению первой менструации их остается 350-500 тыс.

Дальше этот запас будет постепенно растрачиваться. Неверно думать, что за менструальный цикл тратиться всего одна женская клетка. На самом деле одновременно начинают расти сразу несколько ооцитов, из которых овулируют один-два, редко — больше, а остальные погибают. Так что 300 тысяч – это немного.

Поэтому к 35 годам, когда женщина получит образование, сделает карьеру и обзаведется собственным жильем, яйцеклеток может остаться меньше, чем нужно.

Снижают овариальный резерв:

• Естественные процессы увядания. У одних они протекают быстрее, а у других – медленнее. У кого-то запас яйцеклеток сохраняется и в 50 лет, в этом случае возможна беременность в начальной стадии климакса, а кто-то не может забеременеть в более молодом возрасте. Такое состояние называют ранним климаксом.
• Неблагоприятные условия труда и жизни. Проживание в экологически неблагополучных областях и работа на вредном производстве.
• Операции и воспалительные процессы, влияющие на репродуктивное здоровье и курение.
• Наследственная предрасположенность. В семьях, где у мамы наблюдался преждевременный климакс, у дочери запас яйцеклеток исчерпывается быстрее.

Показания к проверке на овариальный резерв

• Бесплодие вне зависимости от возраста, ведь запас яйцеклеток может иссякнуть, когда женщина молода.
• Желание узнать, на какое время можно отложить рождение детей.
• Перенесенные операции, особенно резекция яичника или его части. Вместе с удаленной тканью пропадает и часть фолликулов поэтому их резерв истощается быстрее.
• Нарушения функции яичников и воспалительные процессы половой сферы. Отсутствие беременности, которое женщины списывают на болезни, часто оказываются следствием истощения запаса яйцеклеток в плохо работающих яичниках.
• Вредные условия труда, перенесенная лучевая и химиотерапия.
• Намерение прибегнуть к ЭКО. Если яйцеклеток в организме недостаточно, не стоит тратить время на безуспешные подсадки, а сразу подыскать женщину-донора половых клеток.

Чтобы выяснить, как чувствуют себя яичники, женщине проводят скрининг со сдачей анализов и УЗИ с подсчетом количества оставшихся фолликулов.

Эффективность ЭКО при низком АМГ

К сожалению, при очень скудном овариальном резерве шансы забеременеть с помощью ВРТ невысоки. Одним из важнейших этапов ЭКО является стимуляция овуляции, благодаря которой потом получают несколько яйцеклеток для последующего оплодотворения. При низком АМГ на стимуляцию отзовутся мизерное количество фолликулов, а если учесть, что из полученного материала необходимо отобрать наиболее жизнеспособные яйцеклетки, то процедура теряет смысл.

Так стоит ли прибегать к ЭКО при низком АМГ? Ответить на этот вопрос может только врач. Решение принимается после получения результатов комплексного обследования, составления полной картины общего состояния организма пациентки. Если уровень АМГ ниже 1, шансы забеременеть даже с помощью ЭКО невелики, тем не менее в некоторых ситуациях доктора рекомендуют использовать искусственное оплодотворение. В случаях, когда овариальный резерв истощен критически, может быть рекомендовано ЭКО с донорской яйцеклеткой.

Таким образом, ЭКО при низком АМГ возможно. Все, что требуется от пациентки – как можно скорее обратиться к опытному специалисту. Гинекологи-репродуктологи клиники ВРТ «Дети из пробирки» в течение многих лет успешно решают проблему мужского и женского бесплодия различной этиологии. Записаться на консультацию можно по телефону либо через форму заявки на сайте.

Вся информация носит ознакомительный характер. Если у вас возникли проблемы со здоровьем, то необходима консультация специалиста.

Низкий запас яичников и вероятность беременности

Низкий резерв яичников не исключает материнства, но указывает на то, что времени на беременность становится все меньше и меньше, поэтому вам следует «мобилизоваться» и срочно озадачиться зачатием.

Если забеременеть не получается, нужно срочно обратиться к гинекологу и начать лечение. Например, назначаются: циклические наблюдения с попытками зачатия строго во время овуляции, стимуляция овуляции с попытками наступления естественной беременности, внутриматочная инсеминация.

Низкий резерв яичников также может означать плохую реакцию яичников на стимуляцию лекарственными средствами. В этом случае придется рассмотреть возможность экстракорпорального оплодотворения или замораживания яйцеклеток для дальнейшего ЭКО.

Методы зачатия при низком качестве ооцитов

При плохих показателях анализа ооцитов врачи рекомендуют обратить внимание на альтернативные способы зачатия. Одним из популярных методов считается ЭКО – экстракорпоральное оплодотворение

В ходе процедуры проводят изъятие яйцеклетки из женского организма и ее оплодотворение, а затем ее подсаживают обратно.

Другим популярным способом является донорство ооцитов. В ходе этой процедуры здоровая женщина жертвует собственные ооциты, которые оплодотворяют спермой и перемещают в матку пациентки. Эта операция наиболее актуальна для женщин зрелого возраста, а также в тех случаях, когда свои яйцеклетки пациентки не обладают необходимыми качествами.

К донорству ооцитов прибегают в следующих случаях:

• Наличие проблем с яичниками;
• Пройденное ранее лечение радио- и химиотерапией, оказывающее влияние на формирование ооцитов;
• Наследственная предрасположенность к бесплодию;
• Неудачи при нескольких проведенных ЭКО.

Как и любая другая врачебная процедура и лечение, донация ооцитов имеет конкретные противопоказания, в числе которых онкология, психические отклонения и некоторые соматические заболевания, переносимые пациенткой.

Бесплатный прием репродуктолога
по 30 апреля 2021Осталось дней: 9

Уважаемые пациенты! Клиника «Центр ЭКО» приглашает вас на бесплатный прием репродуктолога с проведением УЗИ и составлением плана лечения.

Другие статьи

Программы ЭКО в регионах
Читать статью

Внимание! Важная информация о работе клиники

Уважаемые пациенты! Забота о вашем здоровье и безопасности – наш долг. «Центр ЭКО» предпринимает все необходимые меры для вашей защиты, в соответствии с рекомендациями Министерства Здравоохранения и Роспотребнадзора по предотвращению распространения вирусной инфекции.

Читать статью

Как определить резерв яичников

Женщины, планирующие ребенка, могут оценить вероятность зачатия,  сделав несколько тестов:

• Анализ ФСГ;
• Анализ АМН;
• УЗИ яичников;
• Анализы на гормоны: эстрадиол, прогестерон, ингибин В.

Анализ ФСГ (фолликулярный стимулирующий гормон)

Тест, определяющий уровни фолликулостимулирующего гормона (также называемого фолликулостимулирующим гормоном), вырабатываемого гипофизом. Именно благодаря ФСГ созревают фолликулы. 

ФСГ тест

Этот гормон обнаружен не только в организме женщин, но и у мужчин, поэтому анализ ФСГ для диагностики бесплодия проводится у обоих полов. Тест ФСГ у женщин включает взятие крови на 3-й день цикла. 

Результаты уровня ФСГ интерпретируют так:

• менее 3 мМЕ / мл – гипофизарная недостаточность;
• 3-9 мМЕ / мл – удовлетворительный резерв яичников;
• 9-12 мМЕ / мл – низкий запас яичников;
• 12-18 мМЕ / мл – запас значительно снижен – яичники практически истощены; 
• выше 18 мМЕ / мл – истощенный запас яичников.

У женщин, в дополнение к диагностике бесплодия, ФСГ может также помочь диагностировать заболевания яичников, такие как синдром поликистозных яичников или другие гормональные нарушения, а также определить, вступила ли женщина в менопаузу.

Анализ АМН (концентрация антимюллеровских гормонов в сыворотке)

AMH — анализ концентрации антимюллеровских гормонов в сыворотке крови. Этот гормон вырабатывается фолликулами, окружающими яйцеклетку, и чем меньше яйцеклеток, тем ниже его концентрация. Тест проводится на любой стадии цикла.

Интерпретация результатов уровня AMH:

• выше 3,0 нг / мл – высокий уровень гормонов, что может свидетельствовать о синдроме поликистозных яичников;
• выше 1,0 нг / мл – нормальный уровень;
• менее 1,0 нг / мл – низкий уровень, который может указывать на низкий резерв яичников, включая менопаузу.

УЗИ яичников с подсчетом антральных фолликулов

Ультразвуковое исследование, определяющее количество антральных фолликулов, которые готовых расти под воздействием природных гонадотропинов, вырабатываемых гипофизом, или гормонов, вводимых во время лечения. Если таких пузырьков меньше 4, есть небольшая вероятность, что вы забеременеете.

УЗИ яичников

Анализы на гормоны: эстрадиол, прогестерон, ингибин В

• Эстрадиол. Если тест на концентрацию эстрадиола на 3-й день цикла показывает концентрацию E2 <75 пг / мл, это означает низкий запас яичников или наличие кист.
• Прогестерон. Если тест на концентрацию прогестерона во второй фазе цикла составляет ≤3 нг / мл, это означает отсутствие овуляции.
• Ингибин B. Это гормон, вырабатываемый зернистыми клетками, расположенными в фолликуле. Результат ниже 45 пг / м (нг / л) на 3-й день менструального цикла указывает на низкий резерв яичников или менопаузу. У женщин в постменопаузе результат будет уже <10 пг / мл (нг / л).

Анализы на гормоны

Когда падает овариальный резерв

Это происходит с 20 лет, и особенно значительное снижение количества яйцеклеток наблюдается с 30 лет. Но не стоит забывать, что  это индивидуальный вопрос. Тезис о том, что после 30 лет репродуктивная способность женщины резко падает, недавно был подорван американским психологом Жанной Твенге. Она утверждает, что эти данные взяты из устаревшей статистики, основанной на опросах совершенно другого, в плане психического развития, населения.

Сегодня женщины дольше физически активны, меньше курят и пользуются гораздо более современными медицинскими препаратами и технологиями. Они даже выглядят моложе! Твенге родила троих детей в возрасте старше 35 лет и поэтому считает, что между потенциалом рождаемости 20-летней и более зрелой женщины разница мала.

Это подтверждается исследованиями 2004 года, проведенными под руководством Дэвида Дансона.  У 770 европейских женщин проанализировали шансы забеременеть. Из участников в возрасте 27–34 лет 86% забеременели в течение года, а в возрастной группе 35–39 лет — 82%. По словам Жанны, это является доказательством того, что фертильность не падает так резко после тридцати лет, как предполагалось ранее. По мнению ученых,  гораздо большей проблемой при беременности являются эндометриоз и закупорка фаллопиевых труб.

Цикл фолликула

На протяжении всего менструального цикла в репродуктивной системе женщины происходят изменения, предшествующие овуляции. Размеры и местонахождение фолликулярных мешков определяется фазами этого цикла:

• менструальная (продолжительность 3-6 дней) – кровотечение из матки, вызванное отторжением эндометрия;
• фолликулярная (продолжительность 14 дней) – процесс развития новых структурных элементов яичников, который начинается с продукции лютеинизирующих и фолликулостимулирующих гормонов, ускоряющих их рост;
• овуляторная (продолжительность 3 дня) – разрыв доминантного фолликула с последующим выходом ооцита, готового к оплодотворению;
• лютеиновая (продолжительность 16 дней) – интенсивная продукция прогестерона и эстрогена, подготавливающих женский организм к беременности.

Созревшие ооциты видны невооруженным глазом на экране УЗИ-сканера. В норме за один менструальный цикл созревает от 1 до 3 доминантных фолликулов.

Этапы ИКСИ

Первый этап – подготовка яйцеклеток. Проводится полноценное медицинское обследование, и устанавливаются причины бесплодия. При необходимости женщина проходит курс гормональной терапии. Далее извлекаются несколько яйцеклеток и помещаются в питательную среду для дальнейшего созревания.

Важно – для ИКСИ используются только полностью созревшие яйцеклетки, после определения их качественных показателей. Второй этап – подготовка сперматозоидов

Получение спермы осуществляется после полового воздержания в течение нескольких дней. Этот день должен совпадать с днем забора яйцеклеток. Метод получения сперматозоидов зависит от репродуктивных проблем мужчины. Если их нет, может быть использован эякулят, полученный в результате мастурбации. В более сложных случаях требуются электростимуляция, механическая вибрация. При азооспермии единственный способ получить сперматозоиды – пункция яичка и его придатков

Второй этап – подготовка сперматозоидов. Получение спермы осуществляется после полового воздержания в течение нескольких дней. Этот день должен совпадать с днем забора яйцеклеток. Метод получения сперматозоидов зависит от репродуктивных проблем мужчины. Если их нет, может быть использован эякулят, полученный в результате мастурбации. В более сложных случаях требуются электростимуляция, механическая вибрация. При азооспермии единственный способ получить сперматозоиды – пункция яичка и его придатков.

После получения материала сперма обрабатывается, мужские половые клетки отмываются и производится их подготовка одним из следующих методов:

• фильтрация;
• флотация;
• центрифугирование;
• проточная цитометрия.

Для оплодотворения методом ИКСИ эмбриолог отбирает один зрелый сперматозоид, ориентируясь на его подвижность, в частности, как интенсивно он совершает поступательные движения, а также морфологическую структуру (она должна быть приближена к нормальной). Если после всех манипуляций удалось получить только единичные подвижные сперматозоиды, прибегают к другим методикам подготовки спермы.

Третий этап – оплодотворение с помощью прокола яйцеклетки методом ИКСИ. В данном случае проводится серия манипуляций:

• подготовка отобранного сперматозоида. Его обездвиживают путем отсечения хвоста с помощью иглы. Эта процедура не вредит ему, но в то же время предотвращает повреждение яйцеклетки;
• обездвиженный сперматозоид аспирируют в стеклянную иглу;
• яйцеклетку фиксируют микроприсоской в нужном положении, эмбриологи его называют «на 9 часов»;
• далее микроиглой с содержащимся в ней сперматозоидом прокалывают оболочки ооцита, при этом содержимое частично аспирируется;
• сперматозоид аккуратно имплантируют в цитоплазму яйцеклетки;
• оплодотворенный ооцит отмывают и помещают в специальные среды для дальнейшего развития.

Риски повреждения яйцеклетки в процессе инъекции сперматозоида во время процедуры ИКСИ составляют менее чем 1%. Ее оболочка отличается высокой эластичностью и самостоятельно закрывается.

Четвертый этап – перенос зародышей. При положительном результате полученные зародыши выращивают в инкубаторе в течение нескольких дней, затем их вводят в матку пациентки. Для повышения шансов на положительный исход обычно в матку помещают сразу два эмбриона, а остальные проходят заморозку и сохраняются.

День 2. Эмбрионы — классификация качества

• На 2-е сутки после слияния генетического материала сперматозоида и яйцеклетки происходит дробление – деление клетки на две.Клетки дробящего эмбриона называются бластомерами. На этой стадии можно оценить качество эмбриона по степени фрагментации (объему эмбриона, занимаемому безъядерными фрагментами цитоплазмы), считается, что чем она больше, тем ниже считается потенциал этого эмбриона к имплантации и дальнейшему развитию. Помимо фрагментации оценивается форма и относительные размеры бластомеров (T. Hardson, 2001).
• Наиболее общепринятая классификация дробящихся эмбрионов по качеству – A-B-C-D, где А – самый лучший, D – самый худший. Цифрами указывают количество бластомеров.